做多重?zé)晒饪偡囋趺崔k?TSA 信號(hào)放大 10-1000 倍!mIHC 五標(biāo)六色實(shí)測(cè)穩(wěn)
來(lái)源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺(tái)
病理檢測(cè)中,你是否常面臨這些難題?—— 想同時(shí)標(biāo)記多個(gè)靶點(diǎn)卻受限于抗體種屬,熒光信號(hào)弱導(dǎo)致結(jié)果模糊,或熒光穩(wěn)定性差影響實(shí)驗(yàn)重復(fù)性?如今,依托多重?zé)晒饷庖呓M化(mIHC)技術(shù)與TSA 酪胺信號(hào)放大技術(shù),這些難點(diǎn)已可輕松解決!
噗啦噗啦實(shí)驗(yàn)室組織染色檢測(cè)平臺(tái)可承接各種染色檢測(cè)外包服務(wù),包括檢測(cè)HE染色、油紅O染色、免疫熒光等實(shí)驗(yàn)外包服務(wù),
多重?zé)晒獾膹?fù)雜性決定了其高失敗率,主要痛點(diǎn)集中在:
信號(hào)太弱:尤其是表達(dá)量低的靶點(diǎn),勉強(qiáng)能看,但根本拍不出高質(zhì)量的圖片用于發(fā)表。
背景太高:內(nèi)源性熒光、非特異性結(jié)合、抗體濃度不當(dāng),導(dǎo)致信噪比慘不忍睹。
通道串色:抗體交叉反應(yīng)、熒光染料光譜重疊嚴(yán)重,結(jié)果根本沒法看,更別提分析了。
一抗種屬限制:想同時(shí)做多個(gè)指標(biāo),卻發(fā)現(xiàn)一抗都來(lái)自同一種屬,傳統(tǒng)方法直接束手無(wú)策。
這些問(wèn)題的核心在于傳統(tǒng)熒光技術(shù)的信號(hào)強(qiáng)度和創(chuàng)新色能力已觸及天花板。你需要一種更強(qiáng)的技術(shù)來(lái)突破極
二、 破局利器:TSA技術(shù)如何實(shí)現(xiàn)信號(hào)放大10-1000倍?
TSA技術(shù)(Tyramide Signal Amplification),又稱酪胺放大技術(shù),是多重?zé)晒忸I(lǐng)域的“游戲規(guī)則改變者”。它的原理堪稱巧妙:
1. HRP催化:一抗與靶標(biāo)結(jié)合后,帶有的HRP(辣根過(guò)氧化物酶)二抗會(huì)緊隨其上。
2. 引爆反應(yīng):當(dāng)你加入帶有熒光基團(tuán)的酪胺底物時(shí),HRP會(huì)立即催化附近的酪胺分子。
3. 原位沉積:被激活的酪胺分子在HRP所在的靶點(diǎn)位置瞬間形成大量、高密度的熒光沉淀物,直接將信號(hào)放大數(shù)十倍乃至上千倍!
這意味著:
? 再微弱的信號(hào)也能被清晰捕獲,輕松實(shí)現(xiàn)低表達(dá)靶點(diǎn)的檢測(cè)。
? 極高的信噪比:信號(hào)強(qiáng)而特異,背景問(wèn)題迎刃而解。
? 突破色數(shù)限制:由于信號(hào)極強(qiáng),可以使用濃度極低的一抗,并通過(guò)循環(huán)剝離/再標(biāo)記流程,輕松實(shí)現(xiàn)5標(biāo)、6色甚至更多,完美解決同種屬一抗難題。
三、 實(shí)測(cè)見證:五標(biāo)六色mIHC,結(jié)果穩(wěn)到不可思議!
理論說(shuō)再多,不如實(shí)測(cè)有說(shuō)服力。在我們長(zhǎng)期的技術(shù)積累和反復(fù)驗(yàn)證中,使用基于TSA技術(shù)的試劑盒對(duì)珍貴臨床樣本進(jìn)行五標(biāo)六色mIHC實(shí)驗(yàn):
? 結(jié)果:所有通道信號(hào)明亮清晰,對(duì)比度極高,細(xì)胞定位精準(zhǔn)。
? 串色控制:通過(guò)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目贵w搭配和流程控制,各通道間無(wú)任何可見串?dāng)_。
? 穩(wěn)定性:連續(xù)多次重復(fù)實(shí)驗(yàn),結(jié)果高度一致,批次穩(wěn)定性遠(yuǎn)超傳統(tǒng)方法。
? 應(yīng)用場(chǎng)景:完美適用于腫瘤免疫(如CD3/CD4/CD8/FoxP3/PD-L1等多靶點(diǎn)共定位分析)、神經(jīng)細(xì)分研究等復(fù)雜課題。
這不僅僅是技術(shù)的升級(jí),更是效率和成功率的革命性提升。
四、 如何獲取這份“避坑”指南?
看到這里,你是否已經(jīng)躍躍欲試?噗啦噗啦實(shí)驗(yàn)室深知從零開始建立一套穩(wěn)定的mIHC-TSA protocol有多么困難。為了幫助大家少走彎路、節(jié)省經(jīng)費(fèi)、更快出成果,我們基于大量重復(fù)性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證與長(zhǎng)期技術(shù)積累,總結(jié)了一套極其詳盡的《mIHC-TSA多重?zé)晒鈱?shí)驗(yàn)權(quán)威Protocol及避坑指南》。
資料包含:
? ** step-by-step 標(biāo)準(zhǔn)操作流程(Protocol)**
? 關(guān)鍵步驟注意事項(xiàng)與疑難解答
? 抗體選擇與優(yōu)化技巧
? 熒光染料搭配方案
? 結(jié)果分析要點(diǎn)
全部資料,免費(fèi)分享!我們?cè)敢庥梦覀兊慕?jīng)驗(yàn),為你的科研之路保駕護(hù)航:18570028002(微信同號(hào))