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   大家好，今天我們來學(xué)習(xí)一個新的實驗——免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation），也就是我們常說的Co-IP實驗。本文由普拉特澤生物分子檢測平臺總結(jié)分享，普拉特澤專業(yè)承接包括coip在內(nèi)的各項分子互作生物實驗代做服務(wù)，同時還開設(shè)了線上下常用實驗操作技能培訓(xùn)班——《春風(fēng)學(xué)院》，文尾附上coip免疫共沉淀實驗操作視頻供大家學(xué)習(xí)，一起來看看吧！

   Co-IP是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。

Co-IP的原理當(dāng)細(xì)胞在非變性條件下被裂解時，完整細(xì)胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來。如果用蛋白質(zhì)X的抗體免疫沉淀X，那么與X在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)Y也能沉淀下來。Co-IP確定的存在相互作用關(guān)系，但這種相互作用并不能確定使用直接作用還是間接作用。

   Co-IP、ChIP、RIP、Pull down作為常見的分子互作驗證方法。它們可以從檢驗的出發(fā)點來區(qū)分：Co-IP、ChIP、RIP是利用已知的蛋白檢測體內(nèi)相關(guān)蛋白、DNA、RNA，并通過蛋白抗體免疫沉淀分離目標(biāo)蛋白、DNA、RNA。Pull down則是根據(jù)已知RNA（RNA pull down）或者已知蛋白（GST pull down）體外檢驗相關(guān)蛋白。Co-IP主要用于檢測蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間相互作用，是IP實驗的一種擴(kuò)展， 基于IP反應(yīng)的潛力，在樣品溶液中捕獲和純化主要目標(biāo)（抗原等）及通過天然相互作用靶標(biāo)結(jié)合的其他的大分子。此外，還可以利用Co-IP來確定在不同條件下的蛋白質(zhì)相互作用。

   那么Co-IP實驗作為科學(xué)研究蛋白相互作用力的經(jīng)典方式，有哪些優(yōu)缺點呢？

   優(yōu)點：

   （1）相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的，處于天然狀態(tài)；

   （2）蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進(jìn)行的，可以避免人為的影響；

   （3）可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。

   缺點：

   （1）可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用；

   （2）兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合可能不是直接結(jié)合，而可能有第三者在中間起橋梁作用；

   （3）必須在實驗前預(yù)測目的蛋白是什么，以選擇最后檢測的抗體，所以，若預(yù)測不正確，實驗就得不到結(jié)果，方法本身具有冒險性。

   （4）靈敏度沒有親和色譜高。

   好啦，關(guān)于Co-IP免疫共沉淀實驗的介紹就講到這里啦，了解小編的都知道小編介紹實驗的四部曲，實驗簡介——實驗步驟——注意事項——常見問題，所以小白們先對實驗有一個簡單了解，之后的實操學(xué)習(xí)才會更輕松哦，想先大家一步學(xué)習(xí)了解更多coip實驗的同學(xué)歡迎點擊：《CO-IP 理論+實操》先一步學(xué)習(xí)哦！