一、Masson染色實驗簡介與原理

實驗簡介：masson染色是指用兩種或三種陰離子染料混合，膠原纖維呈藍色，肌纖維呈紅色。用來顯示組織中纖維以及炎性因子的染色方法之一。

實驗原理：Masson氏染色時膠原纖維呈藍色(被苯胺藍所染)或綠色（被亮綠所染），肌纖維呈紅色(被酸性品紅和麗春紅所染)，這與陰離子染料分子的大小和組織的滲透性有關。如已固定的組織用一系列陰離子水溶性染料先后或混合染色，則可發(fā)現(xiàn)紅細胞被最小分子的陰離子染料著染，肌纖維與胞質被中等大小的陰離子染料著染，而膠原纖維則被大分子的陰離子染料著染。由此說明了紅細胞對陰離子染料的滲透性最小，肌纖維與胞質次之，而膠原纖維具有最大的滲透性。根據(jù)組織不同的滲透性能，選擇分子大小不同的陰離子染料進行染色，便可把不同組織成分顯示出來。

二、Masson染色實驗步驟
step1：石蠟切片脫蠟至水：二甲苯Ⅰ5 min，二甲苯Ⅱ 5 min，二甲苯Ⅲ 5 min，無水乙醇 1 min，95% 乙醇 1 min，75% 乙醇 1 min，自來水沖洗數(shù)秒；

Step2：鉻化處理或去汞鹽沉淀（甲醛固定的組織此步可略）。

Step3：依次自來水和蒸餾水洗。

Step4：用Regaud蘇木精染液或Weigert蘇木精液染核5-10min。

Step5：1% 鹽酸酒精分化 5~15 s，充分水洗；

Step6：滴加 0.1~1% 碳酸鋰 5 min，增加反藍程度，水洗；

Step7：用Masson 麗春紅酸性復紅液5-10min。

Step8：以2% 冰醋酸水溶液洗 1 min；

Step9：1% 磷鉬酸水溶液分化 3-5 min，2% 冰醋酸水溶液洗 1 min；

Step10：不經(jīng)水洗，直接用苯胺藍水溶液或 1% 光綠水溶液染 1~2 min；以 0.2% 冰醋酸水溶液洗 1 min；

Step11： 95% 乙醇脫水 2~3 s，無水乙醇脫水 3 次每次 5 s，二甲苯透明 3 次每次 1 min、中性樹膠封固。

結果：
膠原纖維或蛋白、粘液、軟骨呈藍色（如光綠液染色為綠色），胞漿、肌肉、纖維素、神經(jīng)膠質和紅細胞呈紅色，胞核呈藍紫色。

三、Masson染色實驗注意事項

1．控制好染色步驟。

2．組織固定起著很重要的作用，根據(jù)不同的固定液可延長或縮短染色時間。

3．0.2%冰醋酸水溶液洗，可使色調清晰鮮艷。

4．磷鉬酸水溶液對麗春紅、酸性復紅有分化作用，分化時鏡下控制， 肌纖維和纖維素呈紅色，膠原纖維呈淡粉紅色即可。