
免疫熒光和fish區(qū)別?【建議收藏】
2023-12-15 16:44:09
來(lái)源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺(tái)
大家好!今天普拉特澤生物帶大家學(xué)習(xí)的是在免疫熒光檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中的一些實(shí)驗(yàn)技術(shù)問(wèn)題——關(guān)于免疫熒光和fish區(qū)別。免疫熒光(Immunofluorescence)和FISH(Fluorescent In Situ Hybridization)都是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的重要技術(shù),在細(xì)胞和組織的觀察和分析中具有廣泛的應(yīng)用。雖然它們都是利用熒光標(biāo)記進(jìn)行檢測(cè),但它們之間存在明顯的區(qū)別。普拉特澤生物——病理實(shí)驗(yàn)平臺(tái)操作各類(lèi)組織染色實(shí)驗(yàn)上百例,專(zhuān)業(yè)代做組織染色實(shí)驗(yàn)和各種染色實(shí)驗(yàn),對(duì)大家提出的各種關(guān)于免疫熒光實(shí)驗(yàn)的問(wèn)題都一一做出了回答,希望能對(duì)迷茫的你起到一些幫助~

首先我們重新看一下他們的原理:
免疫熒光是一種利用抗原-抗體反應(yīng)進(jìn)行細(xì)胞或組織中抗原物質(zhì)定位的技術(shù)。它利用熒光染料標(biāo)記抗體,使其與特定的抗原結(jié)合,然后通過(guò)熒光顯微鏡觀察和分析熒光信號(hào)。免疫熒光主要用于研究細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能、檢測(cè)生物分子間的相互作用以及疾病診斷等。
FISH是一種基于熒光原位雜交技術(shù)的核酸探針檢測(cè)方法。它利用特定的核酸探針與細(xì)胞中的DNA或RNA序列進(jìn)行雜交,然后通過(guò)熒光顯微鏡觀察和分析熒光信號(hào)。FISH主要用于檢測(cè)基因或染色質(zhì)異常、染色體變異等遺傳學(xué)問(wèn)題,也可用于腫瘤診斷和預(yù)后評(píng)估等。

標(biāo)記物和染料不同:
免疫熒光利用熒光染料標(biāo)記抗體或抗原,常見(jiàn)的熒光染料包括異硫氰酸熒光素(FITC)、四乙基羅丹明(RB200)等。
FISH利用特定的核酸探針進(jìn)行標(biāo)記,這些探針可以與目標(biāo)DNA或RNA序列特異性結(jié)合,常見(jiàn)的探針標(biāo)記物包括熒光染料、量子點(diǎn)等。
觀察和分析方法:
免疫熒光的觀察和分析主要通過(guò)熒光顯微鏡進(jìn)行,可以觀察熒光的顏色、亮度、分布等信息,從而對(duì)細(xì)胞或組織的結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行分析。
FISH的觀察和分析同樣通過(guò)熒光顯微鏡進(jìn)行,可以觀察探針與目標(biāo)序列的雜交情況以及熒光信號(hào)的強(qiáng)度和分布,從而對(duì)染色體變異、基因表達(dá)等問(wèn)題進(jìn)行分析。
靈敏度和特異性:
免疫熒光具有較高的靈敏度和特異性,可以檢測(cè)出微量抗原的存在,并且可以針對(duì)不同的抗原使用不同的抗體和熒光染料進(jìn)行多重檢測(cè)。
FISH的靈敏度和特異性也較高,可以檢測(cè)出單個(gè)基因的表達(dá)情況,并且可以針對(duì)特定的基因或染色體區(qū)域進(jìn)行多重檢測(cè)。

結(jié)論:
免疫熒光和FISH雖然都是利用熒光標(biāo)記進(jìn)行檢測(cè)的技術(shù),但在原理、應(yīng)用范圍、標(biāo)記物和染料、觀察和分析方法以及靈敏度和特異性等方面存在明顯的差異。根據(jù)不同的研究目的和實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的技術(shù)是進(jìn)行細(xì)胞和組織觀察和分析的關(guān)鍵。
冰凍三尺,非一日之寒,普拉特澤致力于幫助廣大科研工作者解決免疫熒光實(shí)驗(yàn)中的各方面問(wèn)題,不但授人以魚(yú),亦授人以漁。
