siRNA、shRNA 都是啥?【科研小白】
來(lái)源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺(tái)
今天普拉特澤生物帶大家學(xué)習(xí)的是siRNA、shRNA兩種技術(shù)。siRNA(小干擾RNA)和shRNA(短發(fā)夾RNA)是兩種在基因表達(dá)調(diào)控中起重要作用的非編碼RNA分子,它們?cè)谏镝t(yī)學(xué)研究和治療應(yīng)用中具有廣泛的應(yīng)用。普拉特澤生物——工具平臺(tái)操作實(shí)驗(yàn)服務(wù)上百例,專業(yè)代做shRNA載體構(gòu)建和各種實(shí)驗(yàn),希望能對(duì)迷茫的你起到一些幫助~
我們分別開始從不同的類別介紹
siRNA
siRNA是一種雙鏈RNA分子,通常由20-25個(gè)核苷酸組成。其主要功能是在RNA干擾(RNAi)過(guò)程中通過(guò)與目標(biāo)mRNA互補(bǔ)結(jié)合并引導(dǎo)其降解,從而實(shí)現(xiàn)特定基因的沉默。siRNA可以來(lái)源于內(nèi)源性或外源性的長(zhǎng)雙鏈RNA(dsRNA),經(jīng)過(guò)Dicer酶切割后形成成熟的siRNA,并被加載到RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體(RISC)中,進(jìn)而識(shí)別并降解目標(biāo)mRNA。
shRNA
shRNA是一種人工設(shè)計(jì)的含有發(fā)卡結(jié)構(gòu)的單鏈RNA,通常由19-29個(gè)核苷酸組成,通過(guò)病毒載體或其他方式引入細(xì)胞內(nèi)。在細(xì)胞內(nèi),shRNA會(huì)被Dicer酶加工成siRNA,然后參與RNAi過(guò)程,發(fā)揮與siRNA相同的作用。shRNA的設(shè)計(jì)需要考慮其環(huán)序列的長(zhǎng)度和組成,以確保其不會(huì)與靶基因內(nèi)的其他序列產(chǎn)生同源性。此外,shRNA可以通過(guò)穩(wěn)定整合到宿主基因組中來(lái)實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期的基因沉默效果
區(qū)別與聯(lián)系
來(lái)源:siRNA可以直接合成或從長(zhǎng)雙鏈RNA中切割得到;而shRNA則是通過(guò)設(shè)計(jì)特定的發(fā)卡結(jié)構(gòu)并在細(xì)胞內(nèi)加工成siRNA。
㈠穩(wěn)定性:siRNA在體內(nèi)遞送時(shí)容易受到核酸酶的降解,因此需要化學(xué)修飾或載體保護(hù);shRNA由于是單鏈形式,在體內(nèi)遞送時(shí)相對(duì)更穩(wěn)定。
應(yīng)用:兩者都可以用于基因功能研究、疾病模型構(gòu)建以及藥物開發(fā)等領(lǐng)域。shRNA由于其穩(wěn)定性較高且可以在細(xì)胞內(nèi)持續(xù)表達(dá),因此在某些情況下比siRNA更具優(yōu)勢(shì)。
總結(jié)來(lái)說(shuō),siRNA和shRNA都是重要的基因調(diào)控工具,盡管它們?cè)诮Y(jié)構(gòu)和來(lái)源上有所不同,但都通過(guò)類似機(jī)制參與基因沉默過(guò)程,為科學(xué)研究和臨床治療提供了強(qiáng)大的手段。
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