透射電鏡實(shí)驗(yàn)樣品制備技巧
來(lái)源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺(tái)
在材料科學(xué)、生物學(xué)以及化學(xué)等研究領(lǐng)域中,透射電子顯微鏡(TEM)已成為觀察納米級(jí)至原子級(jí)結(jié)構(gòu)的重要工具。然而,高質(zhì)量的透射電鏡圖像離不開(kāi)精心制備的樣品。 透射電鏡實(shí)驗(yàn)樣品制備技巧由普拉特澤生物為大家總結(jié)分享,普拉特澤生物病理實(shí)驗(yàn)平臺(tái)專(zhuān)業(yè)承接免疫熒光/IF實(shí)驗(yàn)外包、、組織芯片等組織染色實(shí)驗(yàn)代做服務(wù),積累專(zhuān)業(yè)豐富的實(shí)驗(yàn)操作經(jīng)驗(yàn)。本文將詳細(xì)介紹透射電鏡實(shí)驗(yàn)樣品制備的技巧,幫助研究人員確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
一、透射電鏡實(shí)驗(yàn)樣品制備的重要性
在透射電鏡實(shí)驗(yàn)中,樣品的制備是獲得高質(zhì)量圖像的關(guān)鍵。一個(gè)成功的樣品制備過(guò)程應(yīng)確保樣品具備以下特點(diǎn):
→樣品厚度適宜:透射電鏡要求樣品厚度小于100nm,以確保電子束能夠穿透樣品,形成清晰的圖像。
→樣品結(jié)構(gòu)完整:制備過(guò)程中應(yīng)盡量避免對(duì)樣品結(jié)構(gòu)的破壞,保持其原有的微觀形貌。
→樣品穩(wěn)定性好:在高真空環(huán)境下,樣品應(yīng)保持穩(wěn)定,避免發(fā)生變形或分解。
圖1
二、樣品預(yù)處理
樣品預(yù)處理是確保樣品質(zhì)量和觀察效果的關(guān)鍵步驟。對(duì)于固體樣品,可能需要通過(guò)切割、拋光或電解拋光等方法來(lái)得到平滑的表面。對(duì)于液體或懸浮液樣品,則需要將其稀釋至適當(dāng)?shù)臐舛?,以便在網(wǎng)格上形成均勻的樣品層。
圖2
三、透射電鏡實(shí)驗(yàn)樣品制備技巧
選擇合適的樣品制備方法:
(1)納米粉末樣品制備:將納米顆粒均勻分散在支持膜上,確保粉末顆粒不團(tuán)聚、不重疊??刹捎贸暡ǚ稚⑵鲗⒎勰┰诜稚⒔橘|(zhì)中分散成懸浮液,然后用滴管滴在覆蓋有支持膜的電鏡銅網(wǎng)上,待其干燥后送入電鏡分析。
(2)塊狀樣品制備:對(duì)于生物組織、高分子和無(wú)機(jī)粉體等材料,可采用超薄切片方法。首先,將待觀察的試樣切割成薄片,再經(jīng)機(jī)械減薄拋光等過(guò)程預(yù)減薄至30-40μm的薄膜。然后,將薄膜鉆取或切取成尺寸為2.5-3mm的小片,裝入離子轟擊減薄裝置進(jìn)行離子轟擊減薄和離子拋光。
(3)保持樣品穩(wěn)定性
在制備過(guò)程中,應(yīng)注意避免樣品受到污染和損傷。對(duì)于含有水分或其他易揮發(fā)物的樣品,應(yīng)先進(jìn)行烘干處理。對(duì)于磁性試樣,要預(yù)先去磁,以免觀察時(shí)電子束受到磁場(chǎng)的影響。
(4)薄片形狀整理
在獲得薄片后,需要對(duì)其形狀和表面進(jìn)行整理。這包括使用不同的研磨和拋光方法將薄片的形狀和表面進(jìn)行調(diào)整,以確保樣品的平滑度和一致性。此外,還需要在薄片上標(biāo)記位置和方向等信息以便于后續(xù)觀察和分析。
(5)提高樣品反差
為了提高TEM圖像的對(duì)比度,可以采用電子染色、投影、負(fù)染色等技術(shù)對(duì)樣品進(jìn)行處理。例如,使用含有重金屬元素的固定劑(如四氧化鋨)進(jìn)行固定,可以增強(qiáng)散射電子的能力,提高細(xì)胞結(jié)構(gòu)的反差。
四、結(jié)語(yǔ)
通過(guò)掌握透射電鏡實(shí)驗(yàn)樣品制備的技巧,我們可以獲得高質(zhì)量的TEM圖像,為科研工作的深入開(kāi)展提供有力支持。希望本文的內(nèi)容能對(duì)你的研究工作有所幫助,讓我們一起在科研道路上不斷進(jìn)步!好啦,那關(guān)于透射電鏡實(shí)驗(yàn)樣品制備技巧我們就介紹到這里啦,還有關(guān)于透射電鏡更多問(wèn)題咨詢(xún)的歡迎留言哦,技術(shù)小姐姐會(huì)第一時(shí)間給到最專(zhuān)業(yè)的回復(fù)噠!還有需要透射電鏡代做服務(wù)請(qǐng)認(rèn)準(zhǔn)咱們普拉特澤哦!