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體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞已有近百年的歷史，人工合成培養(yǎng)基的問(wèn)世促進(jìn)了細(xì)胞培養(yǎng)工作的發(fā)展。當(dāng)粉劑合成培養(yǎng)基配置成液體后稱為培養(yǎng)液，其主要成分是氨基酸、維生素、糖類、無(wú)機(jī)離子以及其他成分。合成培養(yǎng)基種類很多，常用的有十多種，目前使用最廣泛的是RPMI 1640，MEM，DMEM和DMEM/F12。

RPMI 1640培養(yǎng)基：最初為培養(yǎng)小鼠白血病細(xì)胞的需要而制備。開(kāi)始的配方適合懸浮細(xì)胞的生長(zhǎng)，主要針對(duì)淋巴細(xì)胞，后經(jīng)幾次改良從RPMI 1630,1634而至1640，其成分較為簡(jiǎn)單。現(xiàn)發(fā)現(xiàn)它適應(yīng)于多種類型細(xì)胞的生長(zhǎng)，包括腫瘤細(xì)胞以及很多正常組織細(xì)胞體外培養(yǎng)。

MEM培養(yǎng)基：是最低必需培養(yǎng)基，主要是貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)，修改配方后也可用于其他類型細(xì)胞培養(yǎng)，例如如無(wú)鈣（Ca）MEM培養(yǎng)基可被用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)，而Hank’s平衡鹽的MEM培養(yǎng)基可被用于二倍體細(xì)胞的培養(yǎng)。

DMEM 培養(yǎng)基：DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量，同時(shí)又分為高糖型（4500mg/L）和低糖型(1000mg/L)。而MEM中葡萄糖含量1000mg/L。DMEM-高糖型適合生長(zhǎng)較快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞，克隆細(xì)胞，也可用于DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)；高糖型使細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)快，不利于融合細(xì)胞的染色體穩(wěn)定，做單抗細(xì)胞融合時(shí)，一般使用低糖型，DMEM-低糖型主要用于干細(xì)胞的培養(yǎng)。

DMEM/F12(1：1) 培養(yǎng)基：DMEM培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分濃度較高，F(xiàn)12培養(yǎng)液成分復(fù)雜，含有多種微量元素。DMEM和F12以1：1結(jié)合，稱為DMEM/F12培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下細(xì)胞培養(yǎng)，常用于細(xì)胞的克隆生長(zhǎng)及干細(xì)胞培養(yǎng)。

培養(yǎng)液的配置方法大致相同，如下：

1.取一袋干粉培養(yǎng)基，將干粉培養(yǎng)基溶于欲配制液體總量2/3的三蒸水，沖洗包裝袋2次倒入培養(yǎng)液中，加入磁性攪拌棒并置于磁力攪拌器上充分?jǐn)嚢?，確保培養(yǎng)基干粉充分溶解。

2.按照產(chǎn)品說(shuō)明的要求和實(shí)驗(yàn)需要補(bǔ)加NaHCO3。

3.調(diào)整培養(yǎng)液pH值，用pH計(jì)或pH精密試紙觀察調(diào)整結(jié)果達(dá)到pH7.2-7.4。

4.將上述溶液用0.22μm微孔濾膜過(guò)濾除菌。

5.將過(guò)濾除菌的培養(yǎng)液分裝于貼有標(biāo)簽的無(wú)菌貯液瓶中，加蓋瓶塞，密封4℃冰箱存放。

注意：

1. 培養(yǎng)液配制后應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌實(shí)驗(yàn)，以檢測(cè)培養(yǎng)液是否有污染。

2.每批次配制液體數(shù)量以使用2周左右為宜，以免時(shí)間過(guò)長(zhǎng)造成營(yíng)養(yǎng)成分損失。