GST pulldown
GST pull-down實(shí)驗(yàn)是一個(gè)行之有效的驗(yàn)證酵母雙雜交系統(tǒng)的體外試驗(yàn)技術(shù),近年來(lái)越來(lái)越受到廣大學(xué)者的青睞。
相關(guān)實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)承諾函
咨詢(xún)記錄
技術(shù)文章
城市
時(shí)間
國(guó)外
2025-10-16 14:01:32
浙江省嘉興市
2025-10-16 08:54:56
江蘇省南通市
2025-10-16 06:55:01
江蘇省南通市
2025-10-15 14:42:14
江蘇省南通市
2025-10-15 14:26:33
江蘇省無(wú)錫市
2025-10-15 13:11:10
國(guó)外
2025-10-14 21:56:51
河北省滄州市肅寧縣
2025-10-14 12:20:49
廣東省東莞市
2025-10-14 03:26:48
浙江省臺(tái)州市
2025-10-13 13:06:53
如何鑒別我外包的WB實(shí)驗(yàn)是真實(shí)的還是造假了?
2025-07-28 11:40:37
ChIP 實(shí)驗(yàn) protocol 下載:標(biāo)準(zhǔn)流程 + 常見(jiàn)問(wèn)題解決
2025-07-23 17:15:10
ChIP-seq與ChIP技術(shù)對(duì)比:原理、差異與適用場(chǎng)景解析
2025-07-21 17:51:05
ChIP 實(shí)驗(yàn)中染色質(zhì)免疫共沉淀的關(guān)鍵要點(diǎn),新手少走彎路
2025-07-18 17:51:48
ChIP實(shí)驗(yàn)與qPCR結(jié)合使用:數(shù)據(jù)定量方法與分析步驟詳解 引言
2025-07-16 15:17:20
ChIP 實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差?教你 3 個(gè)提高實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性的秘訣
2025-07-11 18:08:09
ChIP實(shí)驗(yàn)全流程深度解析:從樣本制備到結(jié)果驗(yàn)證的專(zhuān)業(yè)指導(dǎo)
2025-07-10 17:53:04
ChIP-seq 與 ChIP 實(shí)驗(yàn)的區(qū)別,一篇文章講清楚
2025-07-08 16:52:10
ChIP 實(shí)驗(yàn)原理詳解:從原理到應(yīng)用的全面科普
2025-07-03 17:38:01
有可能最全的PCR類(lèi)型總結(jié):36種PCR類(lèi)型及其定義、原理和用途
2025-07-03 15:38:51
跑磷酸化蛋白WB的硬核技巧有哪些?
2025-07-02 17:36:43
EdU實(shí)驗(yàn)避坑指南:濃度、孵育時(shí)間、通透劑選擇全解析(附案例)
2025-06-30 18:15:04
如何提取RNA?一文詳解Trizol法提取RNA全過(guò)程
2025-05-09 15:35:46
多組學(xué)分析在膿毒癥模型中的整合應(yīng)用方案
2025-05-06 13:58:48
RNAi研究策略與siRNA的設(shè)計(jì)
2025-03-04 16:11:21
雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)【知識(shí)講解】
2025-02-28 15:40:51
WB樣本粘稠怎么辦?
2025-02-21 14:59:27
PCR全家桶:PCR,qPCR,RT-PCR,RT-qPCR有什么不同呢?
2025-02-10 11:36:56
讀文獻(xiàn)不求人系列一:WB結(jié)果圖解讀
2025-02-10 10:24:58
RACE實(shí)驗(yàn)深度探索:從原理到應(yīng)用的全面解析
2024-12-24 17:25:56
RACE實(shí)驗(yàn)優(yōu)化策略:提升實(shí)驗(yàn)成功率的實(shí)用技巧
2024-12-23 16:43:53
RACE實(shí)驗(yàn)提高擴(kuò)增特異性和效率的新方法
2024-12-19 15:54:29
非編碼RNA的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)
2024-12-10 11:18:15
CHIP引物設(shè)計(jì)四個(gè)注意事項(xiàng)詳細(xì)點(diǎn)
2024-11-21 10:03:27
CHIP引物設(shè)計(jì)教程
2024-11-20 16:55:14
CHIP引物設(shè)計(jì)常見(jiàn)問(wèn)題
2024-11-20 13:37:31
CHIP引物設(shè)計(jì)結(jié)果分析
2024-11-19 13:45:52
CHIP實(shí)驗(yàn)引物要求
2024-11-18 17:02:00
CHIP引物設(shè)計(jì)與基因表達(dá)的研究
2024-11-18 14:48:16
CHIP引物設(shè)計(jì)技巧
2024-11-18 11:44:14
CHIP引物設(shè)計(jì)步驟
2024-11-14 16:31:27
在CHIP實(shí)驗(yàn)中,如何確保引物的特異性和有效性?
2024-11-14 14:47:23
ChIP實(shí)驗(yàn)中引物序列的選擇策略
2024-11-14 11:28:12
CHIP引物設(shè)計(jì)原則
2024-11-11 15:23:51
在進(jìn)行coip實(shí)驗(yàn)時(shí),有哪些常見(jiàn)的注意事項(xiàng)
2024-11-08 14:11:04
在進(jìn)行COIP實(shí)驗(yàn)時(shí),有哪些常見(jiàn)的問(wèn)題和解決方法
2024-11-07 17:34:51
在設(shè)計(jì)COIP實(shí)驗(yàn)時(shí),如何選擇合適的抗體?
2024-11-07 15:50:37
coip實(shí)驗(yàn)應(yīng)用
2024-11-06 17:11:07
coip實(shí)驗(yàn)材料
2024-11-05 15:42:55
如何優(yōu)化CoIP實(shí)驗(yàn)以提高其準(zhǔn)確性?
2024-11-04 14:55:29
分析CO-IP結(jié)果時(shí),有哪些常見(jiàn)的誤區(qū)需要避免?
2024-11-04 13:58:23
coip實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
2024-10-31 16:31:45
coip實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)解讀
2024-10-31 14:48:15
COIP實(shí)驗(yàn)步驟中,去除雜蛋白的具體方法是什么?
2024-10-30 16:33:23
coip實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,如何確??贵w的特異性
2024-10-30 13:26:45
coip實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
2024-10-29 17:22:03
coip實(shí)驗(yàn)流程以及步驟
2024-10-29 15:04:09
coip實(shí)驗(yàn)原理
2024-10-29 13:58:07
巨噬細(xì)胞m1m2標(biāo)志物
2024-10-23 18:20:23
瓊脂糖凝膠電泳與PCR技術(shù)
2024-09-29 18:09:38
介紹一些常用的shRNA表達(dá)載體
2024-09-13 18:16:39
ELISA實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題解答:解決你的所有疑惑
2024-09-09 14:19:56
ELISA實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
2024-09-06 15:43:46
ELISA試劑盒選擇與使用指南
2024-09-03 17:13:14
ELISA實(shí)驗(yàn)中的創(chuàng)新技術(shù)——加速科研進(jìn)程的新工具
2024-09-02 17:54:45
快速解讀ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2024-09-02 15:20:49
ELISA實(shí)驗(yàn)在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用案例
2024-08-30 14:08:20
ELISA檢測(cè)實(shí)驗(yàn)報(bào)告(二)
2024-08-30 11:28:49
ELISA的實(shí)驗(yàn)報(bào)告(一)
2024-08-29 18:40:59
ELISA實(shí)驗(yàn)材料
2024-08-29 13:49:34
ELISA實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析與解讀
2024-08-28 18:03:43
ELISA實(shí)驗(yàn)步驟詳解【輕松上手檢測(cè)】
2024-08-28 15:38:50
什么是ELISA實(shí)驗(yàn)?
2024-08-28 14:55:39
染色質(zhì)免疫共沉淀(CHIP)實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
2024-08-26 18:06:15
解釋ChIP數(shù)據(jù)解讀中需要注意的關(guān)鍵點(diǎn)
2024-08-26 15:53:54
ChIP實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題解答:輕松跨越實(shí)驗(yàn)難關(guān)
2024-08-21 14:17:17
如何優(yōu)化染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)實(shí)驗(yàn)條件?
2024-08-19 18:00:58
染色質(zhì)免疫共沉淀(CHIP)實(shí)驗(yàn)技術(shù)應(yīng)用
2024-08-19 14:06:57
染色質(zhì)免疫共沉淀(CHIP)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析
2024-08-16 18:01:58
染色質(zhì)免疫共沉淀(CHIP)實(shí)驗(yàn)原理詳解
2024-08-16 11:12:20
RNA免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)高級(jí)技巧
2024-08-14 17:25:03
RNA免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)高級(jí)技巧
2024-08-14 17:25:03
RIP實(shí)驗(yàn)和pulldown的區(qū)別
2024-08-12 17:59:30
RNA免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)在生物學(xué)中的應(yīng)用
2024-08-12 14:13:38
RNA免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)材料的準(zhǔn)備
2024-08-09 18:01:09
RNA免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析
2024-08-08 18:06:54
RNA免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)步驟流程詳解
2024-08-08 16:39:43
RNA免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)原理
2024-08-08 15:29:55
基因表達(dá)正調(diào)控與負(fù)調(diào)控
2024-07-24 18:07:05
如何學(xué)習(xí)基因表達(dá)調(diào)控?【小白也能掌握學(xué)習(xí)攻略】
2024-07-19 16:31:34
基因表達(dá)調(diào)控的基本原理
2024-07-19 11:10:56
EMSA凝膠遷移實(shí)驗(yàn)過(guò)程中常見(jiàn)問(wèn)題與解答
2024-04-17 15:08:51
EMSA凝膠遷移蛋白跑不下來(lái)是什么原因?
2024-04-15 11:36:56
EMSA凝膠遷移實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)【分子實(shí)驗(yàn)】
2024-04-11 17:20:46
EMSA凝膠遷移實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
2024-04-11 13:51:11
EMSA凝膠遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析【分子實(shí)驗(yàn)】
2024-04-10 17:27:43
EMSA凝膠遷移實(shí)驗(yàn)電泳圖分析
2024-04-10 15:59:51
EMSA凝膠遷移實(shí)驗(yàn)步驟【EMSA實(shí)驗(yàn)外包】
2024-04-10 10:57:14
EMSA凝膠遷移實(shí)驗(yàn)分類(lèi)【新人必看】
2024-04-09 17:38:55
EMSA凝膠遷移實(shí)驗(yàn)原理
2024-04-09 15:51:10
ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題以及解決
2024-04-01 09:59:09
ELISA實(shí)驗(yàn)步驟(詳細(xì)篇)
2024-03-29 11:36:11
ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
2024-03-27 18:19:23
ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)報(bào)告---ELISA實(shí)驗(yàn)外包
2024-03-27 17:07:44
酶切位點(diǎn)序列表
2023-12-07 13:54:00
常見(jiàn)酶切位點(diǎn)以及保護(hù)堿基
2023-12-04 11:34:17
酶切位點(diǎn)的詳細(xì)步驟 【新手入門(mén)】
2023-11-27 16:51:17
分子互作實(shí)驗(yàn)大全(二)
2023-10-18 15:54:00
分子互作實(shí)驗(yàn)合集(一)
2023-06-28 14:41:31
Dot Blot實(shí)驗(yàn)方法以及操作步驟
2023-04-23 17:16:06
實(shí)驗(yàn)介紹
【技術(shù)原理】
GST pulldown實(shí)驗(yàn)是一個(gè)有效驗(yàn)證酵母雙雜交系統(tǒng)的體外試驗(yàn)技術(shù)。
基本原理:將靶蛋白-GST 融合蛋白親和固化在谷胱甘肽親和樹(shù)脂上,作為與目的蛋白親和的支撐物,充當(dāng)一種“誘餌蛋白”,目的蛋白溶液過(guò)柱,可從中捕獲與之相互作用的“捕獲蛋白”(目的蛋白),洗脫結(jié)合物通過(guò) SDS-PAGE 電泳分離,最后經(jīng)western blot或質(zhì)譜分析,從而證實(shí)兩種蛋白間的相互作用;
1. 確定某一個(gè)蛋白質(zhì)與另一個(gè)蛋白質(zhì)的直接作用關(guān)系。
2. 篩選某一個(gè)蛋白質(zhì)直接結(jié)合的蛋白質(zhì)族群。
3. 驗(yàn)證酵母雙雜交系統(tǒng)結(jié)果的有效性。
【技術(shù)原理圖】
案例展示
優(yōu)勢(shì)與不足
優(yōu)勢(shì):
1. 區(qū)別于CoIP,GST pull down技術(shù)可以明確兩個(gè)蛋白質(zhì)之間是否直接作用。
2. 可用于篩選與目的蛋白質(zhì)直接結(jié)合的蛋白質(zhì)族群。
3. 可聯(lián)合酵母雙雜交系統(tǒng)綜合評(píng)估蛋白質(zhì)之間的相互作用關(guān)系,是一個(gè)有效的驗(yàn)證酵母雙雜交系統(tǒng)的體外試驗(yàn)技術(shù)。
不足:
1. 體外表達(dá)的重組蛋白,無(wú)法完全模擬特定生理狀態(tài)下的蛋白質(zhì)活性及結(jié)合情況。
送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)
樣品類(lèi)型 | 樣品需求 | 保存條件 | 運(yùn)輸條件 | 備注 |
---|---|---|---|---|
動(dòng)物組織 | 單個(gè)樣品>0.1g,2mlEP管或凍存管裝,不要過(guò)量;樣本應(yīng)盡量新鮮,如不能立即提取蛋白或核酸,應(yīng)液氮速凍后凍存于-80℃或更低,凍存樣本避免反復(fù)凍融以致降解 | -80℃ | 干冰 | 所有樣本均須有唯一標(biāo)記,且標(biāo)記清晰可識(shí) |
種子樣本 | 去殼新鮮或保存于液氮中的的種子樣本,單個(gè)樣品>0.2g。 | -80℃ | 干冰 | |
貼壁/懸浮細(xì)胞 | 1. 總RNA或蛋白:106cell/指標(biāo)、漿/核RNA或蛋白:107cell/指標(biāo)、線(xiàn)粒體RNA或蛋白:2*107 cell/指標(biāo),樣本盡量新鮮,細(xì)胞收取后直接加Trizol(QPCR檢測(cè))或直接凍存于-80℃ 2. 若細(xì)胞處理(加藥、轉(zhuǎn)染、感染)后狀態(tài)差應(yīng)酌情加大收樣量 | -80℃ | 干冰 | |
全血/血清樣品 | 用抗凝管保存的外周血 5~10ml,骨髓 1~3ml; -80℃保存不超半周的白細(xì)胞勻漿>400μl,每 400μl 加入 400μl Trizol。 | -80℃ | 干冰 | |
石蠟包埋樣品 | 由標(biāo)準(zhǔn)的石蠟包埋盒包埋的石蠟塊,有效厚度大于 0.1cm; 新鮮的 FFPE 組織切片,每片厚度不超過(guò) 10μm,2~8 張,表面積不超過(guò) 250mm2。 | -20℃ | 冰袋 | |
抗體 | 1. 按樣本種屬提供滿(mǎn)足相應(yīng)實(shí)驗(yàn)要求的抗體; 2. 按抗體說(shuō)明書(shū)要求寄送,盡量避免分裝;如分裝,確保量足夠進(jìn)行實(shí)驗(yàn),并提供抗體說(shuō)明書(shū)。 3.保存抗體的抗體管上應(yīng)有能夠識(shí)別此抗體的標(biāo)記,抗體的量應(yīng)大于實(shí)驗(yàn)所需的量。 | -20℃ | 冰袋 | |
引物 | 干粉,≥1OD,如進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),每個(gè)基因至少提供兩對(duì)引物, 附帶公司引物合成單。 | -20℃ | 冰袋或常溫 |