細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)原理與操作步驟——細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)外包
來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺
細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)原理與詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)操作步驟由普拉特澤生物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺為大家總結(jié)分享,普拉特澤生物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺承接包括細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞侵襲、細(xì)胞增殖、細(xì)胞焦亡、細(xì)胞衰老等各種細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的科研外包服務(wù),為廣大辛勤工作的科研工作者提供最貼心的便利服務(wù),普拉特澤生物 = 最真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。話不多說,現(xiàn)在我們來看看:
一,細(xì)胞劃痕(Wound Healing)實(shí)驗(yàn)原理
細(xì)胞劃痕法是簡捷測定細(xì)胞遷移運(yùn)動與修復(fù)能力的方法,類似體外傷口愈合模型,在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞上,用微量槍頭或其他硬物在細(xì)胞生長的中央?yún)^(qū)域劃線,去除中央部分的細(xì)胞,然后繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞至實(shí)驗(yàn)設(shè)定的時(shí)間,取出細(xì)胞培養(yǎng)板,觀察周邊細(xì)胞是否生長至中央劃痕區(qū),以此判斷細(xì)胞的生長遷移能力,實(shí)驗(yàn)通常需設(shè)定正常對照組和實(shí)驗(yàn)組,實(shí)驗(yàn)組是加了某種處理因素或藥物、外源性基因等的組別,通過不同分組之間的細(xì)胞對于劃痕區(qū)的修復(fù)能力,可以判斷各組細(xì)胞的遷移與修復(fù)能力。
二、細(xì)胞劃痕(Wound Healing)實(shí)驗(yàn)應(yīng)用及意義
細(xì)胞劃痕(Wound Healing)實(shí)驗(yàn)是一種簡單易行的檢測細(xì)胞運(yùn)動的方法,實(shí)驗(yàn)成本低。常用與用于研究腫瘤細(xì)胞的侵襲遷移能力,以及外源因素如,藥物對細(xì)胞遷移能力的影響。
三、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)步驟
首先所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和 marker 筆在操作前紫外照射 30 min(超凈臺內(nèi))。
1、制造傷口:先用 marker 筆在 6 孔板背后,用直尺比著,均勻得劃橫線,大約每隔 0.5~1 cm 一道,橫穿過孔每孔至少穿過 5 條線 →在空中加入約5X105 個細(xì)胞,具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿→ 第二天用槍頭比著直尺,盡量垂至于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不能傾斜→ 用 PBS 洗細(xì)胞 3 次,去處劃下的細(xì)胞,加入無血清培養(yǎng)基。
2、階段培養(yǎng)及觀察:放入37度5% CO2 培養(yǎng)箱,階段時(shí)間取樣,拍照。
四、細(xì)胞劃痕(Wound Healing)實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
1、劃痕法測量適用的細(xì)胞范圍較小,一般只適用于上皮細(xì)胞,纖維樣細(xì)胞。
2、雖然無血清培養(yǎng)可以忽略細(xì)胞增殖的影響,但是由于細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)系統(tǒng)整體性的下調(diào)節(jié),細(xì)胞遷移的速度也會慢很多。
OK,細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)的原理與步驟以及操作時(shí)的一些注意事項(xiàng)我們就講完了,大家應(yīng)該有一個具體的了解了吧,當(dāng)然有不懂的或者還有要給小編補(bǔ)充說明大聰明歡迎給客服留言哦,小編會第一時(shí)間對接技術(shù)給到大家最準(zhǔn)確專業(yè)的回復(fù),如果您有細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)外包的需求,請認(rèn)準(zhǔn)普拉特澤!