什么是RIP檢測?【RIP檢測外包】
來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學整體課題外包平臺
大家好~!今天普拉特澤生物跟大家一起學習的實驗是RIP—RNA結合蛋白免疫沉淀實驗。RIP檢測實驗是應用于蛋白與RNA互作關系的重要參考,普拉特澤生物分子檢測平臺長期為大家提供RIP檢測代做服務,歡迎隨時咨詢。
核酸和蛋白質是組成生命的主要物質,研究細胞內(nèi)RNA與蛋白結合情況,可以了解轉錄后調控網(wǎng)絡的動態(tài)過程,幫助我們發(fā)現(xiàn)的miRNA的的的的的調節(jié)靶點,RIP檢測實驗是應用于蛋白與RNA互作關系的重要參考。
RIP技術(RNA Binding Protein Immunoprecipitation,RNA結合蛋白免疫沉淀),是研究細胞內(nèi)RNA與蛋白結合情況的技術。運用針對目標蛋白的抗體把相應的RNA-蛋白復合物沉淀下來,然后經(jīng)過分離純化就可以對結合在復合物上的RNA進行分析;即用抗體或表位標記物捕獲細胞核內(nèi)或細胞質中內(nèi)源性的RNA結合蛋白,防止非特異性的RNA的結合,免疫沉淀把RNA結合蛋白及其結合的RNA一起分離出來,結合的RNA序列通過microarray(RIP-Chip),定量RT-PCR或 高通量測序(RIP-Seq)方法來鑒定。RIP可以看成是普遍使用的染色質免疫沉淀ChIP技術的類似應用,但研究對象是RNA-蛋白復合物而不是DNA-蛋白復合物。
RIP檢測實驗原理:
1. 用抗體或表位標記物捕獲細胞核內(nèi)或細胞質中內(nèi)源性的RNA結合蛋白。
2. 防止非特異性的RNA的結合。
3. 免疫沉淀把RNA結合蛋白及其結合的RNA一起分離出來。
4.結合的RNA序列通過microarray(RIP-Chi),定量RT-PCR或高通量測序(RIP-Seq)方法來鑒定。
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